SKIN-B

Кожа человека, помимо своей важнейшей защитной функции, играет важную роль в обеспечении метаболического и информационного обмена между организмом и окружающей средой. К сожалению, под воздействием различных повреждающих факторов, как внешних (например, ультрафиолетовое излучение), так и внутренних (например, эндокринно-метаболические нарушения), усугубляемых неумолимым течением времени, она может претерпевать ряд функциональных и структурных изменений, которые в той или иной степени нарушают ее целостность. Это может проявиться изменением цвета кожи, обезвоживанием, снижением эластичности в виде микрососудистых изменений и т.д., особенно заметных в таких областях, как лицо и зона декольте. Для устранения и предотвращения таких проблем кожи, в том числе морщин, в косметической медицине была предложена концепция "биостимуляции кожи". Этот подход основан на инъекциях, направленных на восстановление нормальной структуры и функций кожи, в первую очередь за счет стимуляции фибробластов, которые отвечают за поддержание состояния внеклеточного матрикса и каркасных функций дермы.

Однако важно понимать, что комплекс фибробласт-миофибробласт-фиброцит – это лишь один из элементов гораздо более крупной головоломки, включающей другие компоненты, как клеточные (такие как эндотелий кровеносных и лимфатических сосудов, моноциты-макрофаги, лимфоциты, нервные ганглии и т.д.), так и неклеточные (например, внеклеточный матрикс и другие). Их анаболические процессы должны постоянно уравновешиваться катаболическими процессами и клеточной рециркуляцией, и все это под контролем сигнальных молекул (от свободных радикалов до цитокинов и факторов роста). Другими словами, учитывая сложную структуру и функции кожи на молекулярном уровне, очевидно, что без комплексного подхода одной стимуляции фибробластов может оказаться недостаточно для предотвращения или лечения дегенеративных проблем в дерме.

В области эстетической медицины примечательно наблюдение, что фрагменты гиалуроновой кислоты, содержащие от 20 до 30 мономеров, могут активировать фибробласты, связываясь с рецепторами CD44, тем самым способствуя выработке ретикулярного коллагена III типа. Естественно, это явление зависит от наличия предшественников, ферментов и кофакторов, участвующих в биосинтезе этого структурного белка. Гиалуроновая кислота является основным компонентом внеклеточного матрикса, который играет важную роль в сохранении структуры тканей и регулировании клеточных сигнальных путей. Гиалуроновая кислота обеспечивает защиту от окислительного стресса, поддерживает эластичность кожи, улучшает заживление ран и устойчивость к раку и артриту, что во многом объясняется взаимодействием с CD44 и другими сложными механизмами. В результате предыдущих клинических испытаний была исследована гиалуроновая кислота, смешанная с аминокислотами, с целью борьбы со старением кожи.

Ультрасонография (УЗ) находит широкое применение в исследовательских, клинических и хирургических аспектах. Alexander и Miller в 1979 году использовали прибор с частотой 15 МГц в одномерном режиме для измерения толщины кожи. Сегодня разработаны более высокочастотные аппараты, цель которых – повысить разрешение и увидеть особенности изучаемых поверхностей даже на более коротких длинах волн. Благодаря своей безболезненности и экономичности ультразвук находит все большее применение в различных областях медицины.

В данном исследовании изучается роль гиалуроновой кислоты наряду с различными органическими и неорганическими веществами в профилактике и лечении распространенных недостатков кожи. Цель данного исследования – провести гистологическую и ультразвуковую оценку влияния низкомолекулярных фрагментов гиалуроновой кислоты и аминокислот (HAAM) на омоложение кожи лица с помощью внутрикожных микроинъекций.

Материалы и методы

В исследование были включены двадцать женщин, средний возраст которых составил 45 лет (от 35 до 64 лет), в том числе восемь женщин в менопаузе и двенадцать – в детородном возрасте. Исследование проводилось на кафедре медицинских наук Университета Тираны, Албания, зарегистрировано под № 321 Прот. дата 24.05.2022. В ходе исследования строго соблюдались этические принципы, включая соответствие Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации и дополнительные требования, предусмотренные законодательством Албании. План клинических исследований (ПКИ) для данного исследования был разработан в соответствии с требованиями международного стандарта ISO 14155. Все пациенты дали информированное согласие на проведение процедуры, хотя и не знали о конкретных целях терапии. Среди общих проблем, наблюдавшихся у всех пациентов, были генерализованный ритидоз (морщины), сниженная гидратация кожи, гипоксия, недостаточная выработка себума. Критерии исключения включали в себя особенности в рационе питания, беременность, курение (20 сигарет в день), аллергический и/или ирритативный контактный дерматит рук, системные заболевания и психические расстройства.

После сбора анамнестических данных и физикального осмотра пациенты проходили измерение рН, себометрию, гидрометрию, фотографирование и эхографию в таких областях, как глабелла, кантус, скула, подбородок и шея. Для оценки гидратации кожи, выработки кожного сала и уровня pH использовался прибор SoftPlus (Callegari, Парма, Италия), при этом гидратация измерялась в г/м2/ч, а выработка кожного сала в г/см2/мин. Клинические результаты были опубликованы в предыдущем исследовании. В исследовании использовалась общая основа из низкомолекулярных фрагментов гиалуроновой кислоты, к которой добавлялся буферный водный раствор. Состав включал гиалуронат натрия, а также L-лизин, L-пролин, L-аланин, глицин, L-серин, L-цистеин, L-лейцин, L-валин и L-изолейцин в растворе с бикарбонатом натрия (SKIN-B®, Italfarmacia, Рим, Италия). Пациенты получали лечение препаратами HAAM с использованием техники мезотерапии по 8-недельному протоколу. Раствор вводился в глубокий дермальный слой, при этом в гипотоничных точках вводилось не менее 0,2/0,3 мл. Для точности дозировки использовался шприц объемом 2,5 мл, а также мезоигла 30G х 6 мм. Пациенты проходили по одному сеансу каждые 15 дней, всего четыре сеанса.

Ультразвуковые исследования

До и через три месяца после терапевтической процедуры каждому пациенту проводилось УЗИ. Ультразвуковые исследования проводились в В-режиме с получением двухмерных изображений в продольном или поперечном направлениях с частотой от 5 до 13 МГц (MY LAB X8, ESAOTE, Генуя, Италия). Эти оценки позволили визуализировать эпидермис, дерму и подкожные структуры. Морфологические характеристики, толщина эпителия и толщина дермы оценивались в таких областях, как щечно-скуловая зона, подбородок и нижнечелюстной угол. Толщина дермы и толщина эпителия измерялись путем проведения прямой линии, перпендикулярной эпителию и подкожной клетчатке, с помощью программы Viewer. Всего было проведено 60 ультразвуковых исследований, из них 30 – до лечения и 30 – после.

Гистологическая оценка

До и через три месяца после терапевтической процедуры у каждого пациента проводилась круговая панч-биопсия (KAI Industries, Ояна, Япония) диаметром 2 мм (рис. 2). Биоптат был взят только в угловой части нижней челюсти. До лечения образцы извлекались в области левого нижнечелюстного угла, а после лечения – в области правого нижнечелюстного угла. Это позволило избежать анализа одной и той же области и относительных артефактов. Всего было взято 40 биопсий, из них 20 – до лечения и 20 – после. Образцы были окрашены гематоксилином и эозином, трихромом Массона и с помощью окраски по Ван Гизону. Для каждого образца оценивали четыре поля, каждое диаметром 2000 мкм и длиной 4000 мкм.

Специальная гистологическая оценка была проведена с помощью HAAM на образце испытуемых с дефектами кожи. Иммуногистохимическая реакция на эпидермальный фактор роста (EGF) оценивалась количественно, исключая роговой слой при измерении эпидермиса. Иммуногистохимическая реакция на эндотелиальный фактор роста сосудов (VEGF) оценивалась количественно, исключая роговой слой при измерении эпидермиса.

Гистологическая оценка биоптатов проводилась двумя патологоанатомами из разных медицинских университетов Вероны и Модены-Реджо-Эмилии, чтобы свести к минимуму возможность погрешности интерпретации.

Биопсия проводилась с целью документирования:

– Толщины эпителия

– Толщины дермы

– Количества кровеносных сосудов

– Количества клеток с положительным откликом на эпидермальный фактор роста (EGF)

Результаты

Ультразвуковые исследования

Толщина кожи, эпидермиса и дермы не имела значительной корреляции с лечением HAAM. Анализ данных до и после лечения не выявил статистической разницы в толщине кожи в области скуловой кости, подбородка и угла нижней челюсти.

Гистологическая оценка

До лечения: Биопсия показала снижение числа коллагеновых пучков в ретикулярном слое, а также явные изменения микроциркуляции. Наблюдалось невысокое количество фибробластов и уменьшение эпидермального слоя и соответствующих микроциркуляторных структур. Патологических воспалительных клеток в эпидермисе и эпителии не наблюдалось.

После лечения: Эти результаты наглядно демонстрируют, что инъекционные процедуры HAAM способны стимулировать активность фибробластов, что приводит к выработке ретикулярного коллагена III типа. Эпидермис имел хорошо структурированный вид с увеличенной толщиной. Примечательно, что наблюдалась выраженная репликативная активность эпидермиса, подтвержденная положительными иммуногистохимическими реакциями на эпидермальный фактор роста (EGF). Фибробласты проявляли иммуногистохимический ответ в ядрах герминативного слоя эпидермиса (базальный слой) и в некоторых дермальных клетках. Коллагеновые волокна заметно реорганизовались, повысилась микроциркуляция. Содержание коллагеновых волокон в эпидермисе заметно увеличилось, как и толщина эпидермиса, и все это на фоне отсутствия патологических воспалительных клеток.

Полную версию статьи читайте в журнале "Метаморфозы" № 2024/47.

Размер имеет значение

Долгие годы мы старались отдавать предпочтение высокомолекулярной гиалуроновой кислоте, которая лежит в основе классических схем биоревитализации. При этом важно признать, что вопреки распространенному мнению ревитализирующим свойством обладает не только высокомолекулярная гиалуроновая кислота. В последнее время все чаще появляются гибридные препараты, в которых помимо высокомолекулярной ГК присутствует и низкомолекулярная ГК. Результаты исследований подтверждают, что при применении низко- и среднемолекулярной ГК (в отличие от высокомолекулярной) у пациентов с признаками возрастной атрофии наблюдалось увеличение содержания коллагена и эластических волокон в поверхностных слоях дермы, усиление васкуляризации, а также увеличение толщины кожи на участках атрофии.

Возможно, пора задуматься о том, что высокомолекулярная гиалуроновая кислота не оказывает прямого стимулирующего влияния. В процессе деградации этой молекулы под действием металлопротеиназ происходит укорочение ее цепей с образованием более коротких фрагментов, которые обладают способностью стимулировать фибробласты. Синтез гиалуроновой кислоты регулируется механизмом ауторегуляции по принципу обратной связи. Высокая концентрация ГК во внеклеточном пространстве, например, в период пролиферации и на первых фазах регенерации тканей, частично ограничивает формирование элементов внеклеточного матрикса, в частности коллагена. Более того, в концентрации 1 мг/мл гиалуроновая кислота активизирует некоторые виды металлопротеиназ, присутствующих в матриксе. Для возникновения стимулирующего эффекта гиалуроновой кислоты необходима ее частичная деградация до средне- и низкомолекулярных фрагментов. Низкомолекулярная гиалуроновая кислота, наоборот, ингибирует экспрессию матричных металлопротеиназ, уменьшая их коллагендеградирующее действие, а также стимулирует ангиогенез, деление и миграцию клеток.

В ряде исследований было доказано, что небольшие концентрации экзогенной гиалуронидазы способны увеличивать количество гиалуроновой кислоты за счет расщепления вновь синтезированных цепей по мере их выдавливания через пороподобные структуры из клетки во внеклеточное пространство. Образовавшиеся короткие фрагменты служат для фибробластов сигналом о недостатке ГК в тканях, что, в свою очередь, индуцирует дополнительный синтез нативной ГК. Присутствие низкомолекулярной ГК всегда будет способствовать обновлению дермального матрикса и его омоложению. В частности, было выявлено, что в коже возрастных крыс содержится высокий процент высокомолекулярной ГК, что отражает неспособность стареющих тканей генерировать фрагменты с более низким молекулярным весом и приводит к снижению их регенеративного потенциала. Учеными установлено, что низкомолекулярные фрагменты ГК, состоящие из 20–38 дисахаридов, имеют максимальное сродство к рецепторам CD44 на поверхности фибробластов. Они прикрепляются к рецепторам бивалентным путем и создают оптимальное периклеточное гидрофильное окружение.

Таким образом, препараты, содержащие олигосахариды ГК (20–38 дисахаридов), способны не только моментально гидратировать глубокие слои кожи, но и, что наиболее значимо, обеспечивать стимуляцию фибробластов, воздействуя на специфические рецепторы. Инъекционное введение в дерму гиалуроновой кислоты в виде коротких фрагментов оказывает выраженное стимулирующее действие, поскольку позволяет сократить этап дефрагментации длинных цепочек ГК под действием гиалуронидазы.

Биостимуляция дермы препаратами SKIN

Вышеописанные процессы лежат в основе биостимуляторов SKIN (Italfarmacia, Италия). В линейке представлено 4 препарата, в состав которых входит низкомолекулярная гиалуроновая кислота, состоящая из 28–30 мономеров, и ряд аминокислот в высоких концентрациях. Именно количество этих аминокислот является ключевым фактором для синтеза дермальных компонентов. Препараты SKIN зарегистрированы в России и Европе как медицинские изделия с классом безопасности III и имеют многолетнюю историю применения и безупречную репутацию на рынке инъекционных препаратов.

При всей своей схожести эти препараты отличаются друг от друга составом аминокислотного кластера, присутствием дополнительных компонентов и, соответственно, показаниями к применению и оказываемыми эффектами. Например, в препарате SKIN-B содержится 9 аминокислот в общем количестве 75 мг, а в SKIN-R – 3 аминокислоты, но их суммарное количество достигает 245 мг, что обеспечивает выраженный стимулирующий эффект.

• Препарат SKIN-B содержит буферный бикарбонат (рН = 7,4), который предотвращает закисление дермы, сопровождающее любое воспаление в тканях, в том числе травматического генеза, возникающего при проколе кожи иглой. Основными показаниями к применению SKIN-B является улучшение состояния дермы, нормализация физиологических процессов, а также стимуляция выработки нативной гиалуроновой кислоты, эластина и ретикулярного коллагена III типа.
• SKIN-R в противоположность SKIN-B имеет низкий уровень рН 5,6. Сдвиг в сторону кислотности является травмирующим фактором, который при наличии в составе гипертонического раствора аминокислот запускает процесс биореструктуризации дермы с образованием фиброзного коллагена I типа, который, в свою очередь, уплотняет дерму и дает выраженный лифтинг даже за 1 процедуру.
• Препарат SKIN-OX помимо низкомолекулярной ГК и аминокислотного комплекса имеет в составе витамин С и глутатион, тем самым обеспечивая дополнительную антиоксидантную защиту клеток кожи, в том числе при негативном влиянии УФ-лучей, укрепляет микроциркуляторное русло, корректирует нарушения пигментации, снижает хроническое воспаление в тканях и является мощным инструментом в борьбе с возрастным оксидативным стрессом.
• Препарат SKIN-COLIN имеет в составе холин, являющийся предшественником ацетилхолина. Известно, что холин, согласно принципам эндомодуляции, приводит к повышению синтеза эпидермального ацетилхолина и активации эпидермальной холинергической системы, регулируя тем самым процессы формирования эпидермального барьера, пролиферации кератиноцитов, улучшая микроциркуляцию и ангиогенез. Применение SKIN-COLIN ускоряет процессы репарации и способствует разглаживанию мелких морщин и уменьшению накоплений липофусцина.

Полную версию статьи со схемами и изображениями читайте в научно-познавательном журнале МЕТАМОРФОЗЫ 2024/45.